許多小伙伴不知道自己檢測細(xì)胞增殖的時(shí)候究竟該檢測什么？使用哪些試劑？今天，百螢將總結(jié)的可以測量細(xì)胞增殖的方法、試劑、適用儀器等分享給大家。
細(xì)胞增殖可以通過測量諸如新合成的DNA、總核酸含量或細(xì)胞分裂等參數(shù)來確定（見表1）。 *簡單的方法是使用可與胺反應(yīng)的細(xì)胞跟蹤指示劑（例如CytoTell 染料）監(jiān)視細(xì)胞分裂，這些可滲透細(xì)胞的指示劑與細(xì)胞質(zhì)蛋白共價(jià)結(jié)合。由于這種共價(jià)偶聯(lián)反應(yīng)，CytoTell 染料無法轉(zhuǎn)移到相鄰細(xì)胞中，并且可以在細(xì)胞中保留好幾代（*多可以觀察到9代）。隨著細(xì)胞分裂，CytoTell 染料在子細(xì)胞之間均等分布，并且每一代新細(xì)胞的熒光強(qiáng)度均是其親本的一半。可以使用標(biāo)準(zhǔn)的含甲醛固定劑和基于皂苷的透化緩沖液對用CytoTell 染料標(biāo)記的細(xì)胞進(jìn)行固定和透化，以進(jìn)行進(jìn)一步的細(xì)胞內(nèi)分析。
表1.用于檢測細(xì)胞增殖的試劑和檢測列表。
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檢測類型
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原理
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試劑/測定
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儀器
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檢測細(xì)胞分裂
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使用與細(xì)胞質(zhì)蛋白結(jié)合的可滲透細(xì)胞的染料。（隨著細(xì)胞分裂，染料被轉(zhuǎn)移到子細(xì)胞。新一代細(xì)胞的熒光強(qiáng)度是其親本的一半。）
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CytoTell 染料
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熒光酶標(biāo)儀，熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀
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CytoTrace 染料
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ReadiUse CFSE
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檢測新合成的DNA
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在細(xì)胞周期的S期將修飾的核苷酸摻入新合成的DNA中。一旦摻入，這些核苷類似物就可以用作細(xì)胞周期和增殖標(biāo)記物，可以使用標(biāo)記的探針進(jìn)行檢測以鑒定增殖細(xì)胞。
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Bucculite dT摻入細(xì)胞增殖熒光成像試劑盒
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熒光顯微鏡
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BrdU （需要酶或熒光團(tuán)標(biāo)記的抗BrdU抗體）
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可適用于比色，熒光或化學(xué)發(fā)光儀器
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檢測總核酸含量
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使用可滲透細(xì)胞的核酸染色劑，該試劑能展現(xiàn)出與DNA質(zhì)量成比例的發(fā)射信號(hào)。然后對染色的群體進(jìn)行流式細(xì)胞術(shù)分析，以生成DNA直方圖，觀察細(xì)胞周期每個(gè)階段中細(xì)胞的百分比。
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Cell Meter 熒光活細(xì)胞周期檢測
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流式細(xì)胞儀
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Cell Meter 熒光固定細(xì)胞周期檢測
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核紫 LCS1 活細(xì)胞染料
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Hoechst 33258，Hoechst 33342 和 DAPI
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